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荧光素酶报告基因的检测原理

编辑:广州博鹭腾仪器仪表时间:2018-07-28

    荧光素酶(Luciferase)是生物体内催化荧光素(luciferin)大概脂肪醛(firefly aldehyde)氧化发光的一类酶的总称,来自于自然界能够大概发光的生物。  

    自然界存在的荧光素酶来自萤火虫、发光细菌、发光海星、发光节虫、发光鱼、发光甲虫等。细菌荧光素酶对寒敏感,因此在哺乳细胞的使用中受到限制。现在,以北美萤火虫虫(Photinus pyralis)来源的荧光素酶基因使用的最为遍布,该基因可编码550个氨基酸的荧光素酶蛋白,是一个61kDa的单体酶,无需表达后修饰,直接领有完全酶活。  

    生物荧光实质是一种化学荧光。萤火虫荧光素酶在Mg2 、ATP、O2的参预下,催化D2荧光素(D2luciferin) 氧化脱羧,产生激活态的氧化荧光素,并放出光子,产生550~580 nm 的荧光。 

    那类无需激发光便可发出偏血色的生物荧光,其结构穿透手腕较着强于绿色荧光蛋白(GFP)。荧光素酶是靠酶和底物的相互反应发光,特异性很强,灵敏度下,由于没有激发光的非特异性干扰,信噪比也对照下。


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