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荧光素酶报告基因的检测流程

编辑:广州博鹭腾仪器仪表时间:2018-07-31

    荧光素酶报告基因的检测流程:

    1、重组质粒制备: 制备含有待检测基因-Luc/Rluc的重组质粒;

    2、细胞系选择: 根据实验需要选择细胞株,通常选择转染效率较高的293T细胞或原代细胞等;

    3、共转染: 将带有Luc/Rluc标记的报告基因和目的基因进行共转染,设置不同的检测时间点,一般为24h/48h;

    4、外界干预: 转染后,可进行物理/化学/病毒等的相应刺激; 

    5、细胞处理: 采用进口/国产双荧光素酶检测试剂盒依照protocol操作; 

    6、荧光检测: 使用GENios Pro 酶标仪或具有类似检测功能的设备进行荧光强度检测。  

    荧光素酶报告基因的优点:

    1、优越的灵敏度,比Westernbloting灵敏度高1000倍以上;

    2、内源性低,哺乳动物无内源性表达; 

    3、荧光素酶检测不受细胞内其他物质影响; 

    4、发光检测,检测方便; 

    5、灵敏度高,10‐20摩尔荧光素酶分子; 

    6、检测范围广,大于7个数量级。

    广州博鹭腾仪器仪表有限公司坐落在广州大学城国家数字产业基地(东区),专注于光子信号的高效率接收识别技术的开发,并将此技术应用于生命科学研究、食品安全检测、环境质量监控、医学诊断服务等领域,集研发、生产、服务于一体,是目前国际上极少数可以提供一系列专业光子检测设备的专业化公司。



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