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化学发光免疫分析

编辑:广州博鹭腾仪器仪表时间:2018-09-07

化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA)是将化学发光分析和免疫反应相结合而创立的一种新的免疫分析技术。那类体式格局不单领有化学发光分析的下灵敏度和抗原抗体反应的下度特异性,而且还领有分离简便特点,否以实现自动化分析,使之成为医学、生物学研究范围中一种新的主要的免疫学分析能耐。

发光与化学发光剂

1. 发光

  一种物质由电子引起态回复到基态时,释放出的能量表现为光的发射,称为发光 (luminescence)。依照组成引起态分子的引起可否将发光分为三种典范:光照发光、生物发光和化学发光。

  1光照发光(photoluminescence) 发光剂经短波长入射光照射后进入引起态,当回复至基态时发出较长波长的否见光。

  2)生物发光(bioluminescence) 榜样例子为萤火虫发光。反应底物为萤火虫荧光素 (firefly luciferin),在荧光素酶(luciferase)的催化下控制ATP产能,生成引起态的氧化荧光素 (oxyluciferin),后者在回复到基态时多余的能量以光子形式搁出  3)化学发光(Chemiluminescence) 在常温下经化学反应所产生的发射光。化学发光是一个多步伐的历程,其机制为某些化合物(发光剂或发光底物)否以控制一个化学反应产生的能量使其产物分子或反应中间态分子上升至电子引起态。当此产物分子或中间态分子衰退至基态时,以发射光子的形式释放能量(即发光)。

  2.化学发光

  发光剂是指在发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物,依照上述发光特点否将发光剂分为荧光素、生物发光剂和化学发光剂三种。下面主要叙述化学发光免疫技术中常用的化学发光剂或发光底物。

  1)酶促反应的发光底物 是指经酶的降解作用而发出光的一类发光底物,目前化学发光酶免疫技术中常用的酶有辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)。HRP的发光底物为鲁米诺或其衍生物和对-羟基苯乙酸。AP的发光底物为3-(2-螺旋金刚烷-4-甲氧基-4-甲基-4-(3-磷酸氧基)-苯基-1,2-二氧乙烷(AMPPD)和4-甲基伞形酮磷酸盐(4-MUP,荧光底物)。


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