产品规格
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 售价(元) |
| 外泌体纯化SEC柱（SEC Exosome Purification Column） | EXP004 | 1 T | 800 |
产品简介
外泌体是由活细胞分泌的具有生物活性的膜结构物质，直径在50-150nm左右，并且不能自行复制的具有脂质双分子层的小囊泡。外泌体广泛分布于细胞上清，血液，尿液，脑脊液，唾液，滑液，羊水，牛奶中，在植物与细菌中也有分布。外泌体含有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等物质，在细胞间通讯、物质运输和免疫调节等方面发挥着重要作用。
外泌体纯化SEC柱（SEC Exosome Purification Column）是通用型外泌体纯化试剂盒配套重要组分，原理是当颗粒进入SEC柱中的多孔多糖树脂时，更小的颗粒被困在孔隙中，它们从柱子中出来的时间被延迟。当液体流出柱子时，连续收集馏分。颗粒根据大小不同分布在各个馏分中，较大的颗粒先离开柱子，较小颗粒，蛋白等小分子后离开柱子。颗粒不与树脂发生化学结合，保证分离稳定性和可重复。
保存条件
常温运输存储，有效期 1 年。
使用方法
SEC柱的使用方法详情见通用型外泌体纯化试剂盒产品，SEC柱使用前需平衡到室温，所用试剂需经0.22 μm过滤处理。
（1）柱平衡：若柱保存在4℃，室温放置30 min，置于重力柱支架上（自备），柱下部放置废液收集烧杯。实验前确保SEC柱子处于室温后再打开顶部柱塞和底盖，将管中保存液排空至底部出口无液体流出，向柱中加入15mL 无菌PBS洗涤填料（可分次加入），可让液体全部流出。
（2）上样：底部无液体流出时加入0.5 mL样品（样品不足0.5 mL用PBS稀释混匀补足），让样品全部进入筛板。
（3）空隙体积：当样品全部进入筛板，底部无液体流出后加入2.5 mL PBS等待PBS流过直至无液体流出，此过程底部流出0.5 mL+ 2.5 mL的体积为空隙体积（可丢弃的洗脱液）
（4）收集外泌体馏分：上步骤底部液体完全流出后，加入0.5 mL PBS，使用EP管收集流出液，收集体积为0.5 mL，标记为馏分1。馏分1完全流出后再加入0.5 mL PBS，收集流出液为馏分2。重复此步骤收集4个馏分（每一次收集需等待上一个馏分完全流出后才能加PBS），纯度最佳为前3个馏分即1.5 mL 体积，高回收率推荐合并前4个馏分即 2mL 体积。
（5）柱再生：收集到所需体积后，用10 mL 再生液进行清洗，再用20 mL PBS 清洗，随后可进行第二次上样。
（6）柱储存：如果要储存以备将来使用，先用10 mL 再生液进行清洗，再依次用 20 mL PBS、20 mL去离子水20 mL的20%乙醇清洗，清洗结束后盖上底盖，倒入保存液（20%乙醇），盖上顶盖密封可置于4 ℃或常温储存。
注：再生液为通用型外泌体纯化试剂盒组分，碱性，避免再生液清洗后直接添加去离子水或 20%乙醇来平衡纯化柱，防止树脂床内的盐沉淀并损坏柱，去离子水清洗可进一步洗去平衡过程中产生的盐，防止盐与 20%乙醇直接接触产生结晶。
注意事项
1．为了您的自身安全，实验前请做好有效防护。
2．为避免SEC柱中过滤堵塞，建议对其他粘度较高的的生物样品进行过滤或离心处理，以去除较大的颗粒物。
3．当外泌体馏分用于后续高通量测序或者其他组学分析时，为避免交叉污染，建议使用新柱。
4．请注意使用过程中勿将柱子从高处摔落或摔打导致柱床碎裂，洗脱过程避免柱内液体流尽后，填料干放时间过长。
5．柱再生过程中不可避免会产生盐，盐沉淀影响填料性能，每根柱子重复使用次数建议不超过5次。
6．本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内!