产品规格：
产品名称 | 产品编号 | 产品规格 | 售价（元） |
PKH26 | FD-CDP001 | 1mg | 1400 |
FD-CDP002 | 5mg | 6500 |
产品简介：
PKH26 是一种亲脂性红荧光染料（（红色，Ex/Em:551nm，567 nm）），脂肪族尾部可以迅速嵌入暴露的细胞膜脂质双层并形成强的非共价相互作用，可用来标记追踪体内外的多种细胞，且具最长的体内半衰期，超过100天，非常适用于体内细胞示踪、细胞增殖研究和其他长期实验，PKH26与其他绿色PKH互补，在混合细胞群内能定量分析，且不会受PHK2，PKH67或FITC标记的抗体干扰。同时PKH26也可用于监测外来病毒、血小板和其他纳米颗粒的摄入。
本产品以高纯度PKH26粉末形式提供实验者可灵活使用，同时本司也提供PKH26红色细胞膜染色试剂盒（配备染色流程所用的稀释液C（Dilution C），详情见同系列产品介绍；PKH26也可用于外泌体的标记与示踪，详情见外泌体染料产品。
产品基本信息：
名称：PKH26
产品编号：FD-CDP001
规格：1mg
存储条件：-20°C避光保存
保质期：12个月
产品基本参数：
分子量（g/mol）：~961
形态：固体粉末
纯度：95+%
溶剂：EtOH/DMSO/DMF等
激发波长：551 nm
发射波长：567 nm
保存条件：
避光干燥保存；粉末状态：-20 °C，有效期二年。溶液状态： -20 °C，有效期一年；
使用方法：
1.染色液制备
1) 配置DMSO或EtOH 储存液：储存液用DMSO或EtOH配置浓度1～5 mM。储存液分装储存在-20 ℃或-80 ℃，避免反复冻融。
2) 工作液制备：根据染色体系用合适的缓冲液（如：专用Dilution C，无血清培养基，PBS等）稀释储存液，配制浓度为1～5 μM的工作液。最佳染色的工作液浓度与细胞系和实验体系有关，可多次尝试染色实验优化，且工作液现配现用。
注：PKH染料系列的溶解受血清，盐组分影响，会引起细胞相关染料聚合物产生，造成非特异性荧光背景，建议使用专用稀释液C（Dilution C）分散待标记细胞，及配置工作液。
2.悬浮细胞染色
1) 悬浮细胞准备：加入适当体积的缓冲液（同工作液的溶液）重悬细胞，染色细胞浓度可尝试1×106__107/mL。例如1 mL的Dilution C重悬2×106个细胞，轻轻吹匀以确保完全分散。
2) 孵育细胞：向上述细胞悬浮液加入适量工作液，使其体系PKH终浓度配制浓度为1～5 μM，在室温或37 ℃环境避光孵育细胞，不同的细胞最佳培养时间不同。建议首次孵育细胞5 min，之后可优化孵育时间，以得到均一的标记结果。例如1 mL的Dilution C重悬2×106个细胞后，加入1 mL的4 μM工作液，得到1×106/mL密度，PKH26工作终浓度为2 μM，总体积2 mL的工作体系。
注：① PKH26标记终浓度需根据不同细胞类型，孵育时间等实验体系通过预实验进行优化；②染色体系体积避免在很小(<100 μL)或很大(>5 mL)的体积下进行染色；③较长的细胞孵育可能引起某些细胞类型活力降低，根据不同细胞状态和染色程度适当调整孵育时间和工作液终浓度；
3) 清洗多余染料：孵育结束，可以加入等体积染色终止液(如2 mL)或其他适当蛋白溶液(比如1% BSA)，孵育1min结合多余的探针，以800 -1000 rpm离心细胞10 min，小心去除上清液，使用完全培养基重悬，重复清洗2遍，注意缓慢操作。
3.贴壁细胞的染色
1) 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
2) 从培养基中移走盖玻片，吸走过量培养液，将盖玻片放在潮湿的环境中。
3) 在盖玻片的一角加入适当体积（500 μL）的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
4) 以相同悬浮细胞的孵育条件进行孵育，及孵育时间优化。
5) 吸干染料工作液，用培养液或缓冲液清洗盖玻片3次以上。
注：本方案仅供参考，具体实验条件请研究人员依据自身项目进行优化。
4.外泌体的染色
1) 使用适量的Dilution C或其他合适缓冲液（100 μL）（不含血清或BSA的PBS等溶液）分散外泌体样本；
2) 根据染色体系用合适的缓冲液（如：专用Dilution C，无血清培养基，PBS等）稀释储存液，配制浓度为 100 μM 的染料工作液，取适量的工作液加入外泌体溶液，使用Dilution C定容，使其体系标记浓度在2~20 μM。
3) 加入染料工作液后将离心管盖紧，通过涡旋振荡器混匀，再放置于 37 °C避光孵育 1-5 min。
注：1，PKH26标记终浓度需根据不同外泌体、外泌体颗粒数、纯度等实验体系通过预实验进行优化，且避免在很小(<100 μL)或很大(>5 mL)的体积下进行外泌体的标记；3，PKH26母液不可直接加入外泌体溶液中，必须经过Diluent C液稀释后加入外泌体溶液；4，Dilution C为亲脂性膜染料标记专用液，无生理盐和缓冲剂，最大化染料溶解性，减少PKH染料的自聚集，因此标记体系尽可能在Diluent C液进行。
4) 向孵育后的外泌体-染料复合物中加入10 mL的1X PBS混匀，按照外泌体提取方法（离心或其他）再次提取外泌体，以去除多余染料，重悬沉淀物，沉淀即为染色后的外泌体。
注意事项
1) 为了您的自身安全，实验前请做好有效防护；
2) PKH26 母液易水解，建议分装保存，分装后用封口膜密封保存，最佳染色的工作液浓度与细胞系和实验体系有关，可多次尝试染色实验优化，且工作液现配现用；
3) 本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内！