试剂产品

产品规格

产品简介

G25脱盐纯化柱是一种交联葡聚糖G25为基质的凝胶过滤预包装即用型层析柱（脱盐柱），该基质是一种具有三维网状结构的多孔性高分子聚合物，具有分子筛功能，即根据分子大小差异进行分离。层析时，大于凝胶孔径的生物样品（如蛋白质，多肽，核酸等，分子量通常＞5KDa），被阻于凝胶颗粒外部，沿凝胶颗粒之间的间隙走，下移速度最快，最先洗脱下来，而小分子（如缓冲液成分、盐类、染料等）因为能够进入凝胶颗粒孔中，最后被洗脱下来。主要用于去除蛋白质、核酸、多肽、多糖等样品的盐离子、去垢剂、小分子染料、缓冲剂等杂质，可分离分子量 >5 KDa 的蛋白或 >10 碱的 Oligo 样品.

此产品2mL/6mL规格用于上样体积 在0.2 mL-0.6 mL范围的蛋白纯化。

基本信息

保存条件

  常温运输存储，有效期一年。

使用方法

注：样品上样前需通过离心或0.45μm滤膜去除不溶物。

（1）柱平衡：若柱保存在4℃，室温放置一段时间，置于重力柱支架上（自备），柱下部放置废液收集烧杯。实验前确保柱子处于室温后，移除脱盐柱的下堵头，然后将脱盐柱的下端浸没到缓冲液中，再移除脱盐柱的上堵头，向脱盐柱中加入缓冲液充满柱管，每次约2 mL，待柱管中的缓冲液全部进入脱盐柱，再次倒入缓冲液充满柱管，重复此步骤5-10次（缓冲液为预期要替换的缓冲液，如PBS、去离子水等）。

（2）上样：脱盐柱用缓冲溶液平衡后，用移液器吸取待脱盐样品（上样量通常为柱床体积的10-30%），缓慢加到凝胶表面的筛板中央，使样品缓慢进入凝胶，直至与凝胶齐平。

注：葡聚糖凝胶颗粒之间的间隙体积约为柱床体积的30%，也为最大上样体积（Vmax）。对于实际上样体积小于Vmax的样品，在样品完全进入凝胶后，可继续加入平衡缓冲液叠加，将体积调整至Vmax。让样品或平衡缓冲液完全进入柱床，此时弃去流出液，再加一定体积的洗脱液，准备收集管，回收该部分样品。

（3）洗脱：当样品完全进入凝胶后，准备样品收集管，用洗脱缓冲液进行洗脱并收集样品。

注：推荐的样品流速约为1-2 mL/min；洗脱缓冲液体积通常为上样体积的1.2 - 1.5倍。

（4）清洗与再生：使用 10-20 mL 的0.2 M 氢氧化钠或其他非离子型去污剂冲洗柱床。

（5）储存：实验完成后，10-20 mL 的20%乙醇清洗，最后储存于20%乙醇溶液中。

注意事项 

1.为了您的自身安全，实验前请做好有效防护。

2．为防止交叉污染，本产品建议一次性使用；脱盐柱反复使用，可能会导致样品回收率降低。

3．请勿冷冻保存本产品，冻结会导致脱盐柱的基质碎裂。

4．请注意使用过程中勿将柱子从高处摔落或摔打导致柱床碎裂，洗脱过程避免柱内液体流尽后，填料干放时间过长。

5．保存和纯化过程中应始终保持基质湿润，避免气泡进入脱盐柱中。

6．本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内！