产品规格
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 售价/元 |
G25 脱盐纯化柱,6mL/12mL | GPC003 | 5 T |
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GPC004 | 20 T |
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产品简介
G25脱盐纯化柱是一种交联葡聚糖G25为基质的凝胶过滤预包装即用型层析柱(脱盐柱),该基质是一种具有三维网状结构的多孔性高分子聚合物,具有分子筛功能,即根据分子大小差异进行分离。层析时,大于凝胶孔径的生物样品(如蛋白质,多肽,核酸等,分子量通常>5KDa),被阻于凝胶颗粒外部,沿凝胶颗粒之间的间隙走,下移速度最快,最先洗脱下来,而小分子(如缓冲液成分、盐类、染料等)因为能够进入凝胶颗粒孔中,最后被洗脱下来。主要用于去除蛋白质、核酸、多肽、多糖等样品的盐离子、去垢剂、小分子染料、缓冲剂等杂质,可分离分子量 >5 KDa 的蛋白或 >10 碱的 Oligo 样品.
此产品2mL/6mL规格用于上样体积 在0.6 mL-1.8 mL范围的蛋白纯化,可离心式。
基本信息
规格 | GPC001- GPC002 |
基质 | G25 |
粒径 | 50~150 μm |
柱管体积 | 12 mL |
柱床体积 | 6 mL |
推荐上样体积 | 0.6~1.8 mL |
分离范围 | >5KDa 的蛋白或 >10 碱的 Oligo |
分离方式 | 重力法或离心法 |
保存溶液 | 0.02%的叠氮化钠或20%的乙醇 |
运输条件 | 低温运输(避免碰撞) |
保存条件
常温运输存储,有效期一年。
使用方法
注:样品上样前需通过离心或0.45 μm滤膜去除不溶物。
(1)柱平衡:若柱保存在4℃,室温放置一段时间,实验前确保柱子处于室温后,将适配接头放入50mL离心管中备用。打开脱盐柱上盖,再打开柱子下盖,将脱盐柱放入准备好的离心管中,流出保护液。用约4-5个柱床体积的平衡缓冲液(如PBS、去离子水等)平衡柱子后,将柱子放在50mL离心管中,再加入1个柱床体积的平衡缓冲液后1000xg 离心1min除去平衡液。
(2)上样:用移液器吸取待脱盐样品(注:上样量通常为柱床体积的10-30%,样品体积不能超过脱盐柱规定的样品量体积,否则会降低样品回收率,并且会导致脱盐不充分),缓慢加到凝胶表面的筛板中央,使样品缓慢进入凝胶,静置,等待全部进入脱盐柱。
(3)离心:1000xg 离心2min,收集流穿液,即可获得纯化好的样品了。
(4)清洗与再生:使用 2×蛋白质洗脱缓冲液,用量是每1mL填料使用1mL 缓冲液。加入洗脱缓冲液后静置5min。再用平衡液冲洗柱子。
(5)储存:实验完成后,10-20 mL 的20%乙醇清洗,最后储存于20%乙醇溶液中。
注意事项
1.为了您的自身安全,实验前请做好有效防护。
2.为防止交叉污染,本产品建议一次性使用;脱盐柱反复使用,可能会导致样品回收率降低。
3.请勿冷冻保存本产品,冻结会导致脱盐柱的基质碎裂。
4.请注意使用过程中勿将柱子从高处摔落或摔打导致柱床碎裂,洗脱过程避免柱内液体流尽后,填料干放时间过长。
5.保存和纯化过程中应始终保持基质湿润,避免气泡进入脱盐柱中。
6.本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内!