服务货号

DZPS01

 

服务简介

  本服务旨在为客户提供从质粒构建到载体构建的一站式基因递送工具开发服务。病毒载体构建服务包含慢病毒、腺相关病毒、腺病毒和逆转录病毒载体等;构建内容包括基因过表达载体构建、基因定点突变表达载体构建、用于基因沉默的shRNA设计与构建、microRNA表达与封闭载体设计与构建、萤光素酶报告基因载体构建(UTR、启动子及其它功能序列)以及Cre-LoxP系统和CRISPR/Cas9基因编辑工具载体设计与构建等。

 我们依托成熟的分子克隆技术平台,将客户提供的目的基因(或干扰片段、编辑元件)精准插入各类表达载体中,经严格测序验证后交付高纯度、高拷贝的重组质粒或病毒颗粒。


服务流程

 

 服务优势

(1)丰富的过表达载体库

·荧光标记:GFP、mCherry、CFP、BFP、EYFP、mNeonGreen、tdTomato、 mScarlet…

·标签标记: FLAG、 HA 、Myc、His tag…

·抗性标记:Puro、Neo、Hygro、BSD

(2)丰富的载体类型丰富

·慢病毒载体(Lentivirus):感染分裂相与非分裂相细胞,适用于稳定细胞株构建

·腺病毒载体(Adenovirus):高滴度、高表达,适用于瞬时高效表达

·腺相关病毒载体(AAV):低免疫原性,适用于体内基因递送

·逆转录病毒载体(Retrovirus):适用于分裂相细胞的稳定整合

(3)严格质控

·质粒:双向测序验证,确保序列100%准确

·病毒:滴度测定(物理滴度/感染滴度)、无菌检测、支原体检测

 

服务需知

(1)服务告知

单纯质粒转染具有表达快速(导入后约24小时即可检测)、构建技术简单、成本较低等优点;但其局限性也较为明显:转染试剂对部分细胞存在一定毒性,且对于原代细胞、悬浮细胞等难转染细胞类型效率较低;更重要的是,质粒通常不整合至细胞基因组,仅能实现瞬时表达,无法满足长周期观察或稳定细胞株构建的实验需求。若您的实验需要实现稳定表达、感染难转染细胞、或进行长周期观察,我们建议在质粒构建的基础上,进一步包装为慢病毒、腺病毒等病毒载体,以满足不同实验场景的需求。我们将根据您的具体实验目的,为您推荐最合适的基因递送方案。

不同表达载体的区别

表达系统

真核表达载体

慢病毒载体

重组腺相关病毒载体

重组腺病毒载体

载体基因特性

双链DNA质粒

RNA逆转录病毒

单链DNA病毒

双链DNA病毒

外源基因表达时间

24h开始表达,持续3-7天

2-4天开始表达,长时间稳定表达

7-14天开始表达

1-2天开始表达

插入片段大小

8kb左右

4kb左右

2.8kb左右

6kb左右

稳定细胞株筛选

难操作

可以

不可以

不可以,瞬时表达

细胞实验

细胞系,部分转染效率低

首选,广谱,感染效率高

不适合

广谱,感染效率高

动物实验

不适合

适合,根据观察时间和注射部位

首选,根据观察时间和注射部位

免疫原性高,慎选

滴度范围

108~109TU/ml

1012-1013vg/ml

1010-1011pfu/ml

(2)服务周期和价格

本服务为定制化项目,具体周期与价格需根据您的实验需求进行评估后确定。评估主要依据以下关键因素:目的基因信息;载体需求;宿主细胞类型;构建类型等

请您提供上述信息,我们的技术团队将根据实验方案进行评估,并在1-2 个工作日内为您出具详细的报价单与项目周期计划表,确保方案合理、价格透明、周期可控。