产品规格

产品简介

本试剂盒为三组分体系（Solution A、Solution B、Solution C），基于首创的鲁米诺底物发光动力学调控技术，专为高背景、高噪点、信噪比差、目的条带弱的 Western Blot 场景设计，可从根源消除背景与非特异噪点，显著提升条带清晰度与信噪比。试剂盒核心在于Solution C（发光延迟剂 / 动力学调节剂），通过非线性调控 HRP 酶促发光起始时间，实现目标条带与背景噪点在时间维度上完全分离。因此本品能极大提升免疫印迹（WB）显影品质，改善实验结果、减少重复实验，有效节约时间与成本。发光信号稳定易检测，灵敏度出色，超敏型号支持飞克级检测，适用于各类免疫印迹实验场景。

保存条件

2-8 ℃保存，有效期12个月。Solution A和Solution C需注意避光保存。

使用方法

1. 常规显影

1) 按常规Western blot操作进行，二抗孵育后，在进行最后一次洗涤时根据膜的大小（每10 cm² 膜混合0.5 mL Solution A和0.5 mL Solution B），按照Solution A: Solution B=1:1比例配制发光检测工作液。

注：工作液建议现配现用，配制后室温放置数小时后灵敏度可能略有降低。

2) 用平头镊子将膜取出，膜的下缘轻轻接触吸水纸，以去除膜上多余的液体。膜的蛋白面朝上，用吸管将配制的发光检测液转移到蛋白膜上，使其均匀覆盖，室温孵育2 min。

注：增加孵育时间不会增加灵敏度，有时还会导致条带曝光时显示异常。发光过程的本质是酶促反应，加入发光液过少同样不利反应进行，会导致膜上条带曝光不均和灵敏度明显降低。

3) 用平头镊子夹持蛋白膜，膜的下缘轻轻接触吸水纸，以去除膜上多余的发光液。将膜的蛋白面朝上并包裹于洁净保鲜膜内，轻轻赶出气泡。

4) 压片检测：将膜固定在暗盒后，暗房内取出X光胶片放置暗盒中压片1分钟，立即显影定影，根据其曝光结果，缩短或延长下一张X光胶片的压片时间。

5) 化学发光成像仪检测：将膜直接放置于化学发光成像仪载物台中，然后参考仪器的说明书进行信号检测。

2. 低背景显影

1) 是否添加 C 液需依据实验需要判断。建议先进行常规显影，如需消除噪点和提升信噪比，可将膜置于 PBS（pH 7.4）中洗掉原有发光液，再利用 A+B+C 混合液进行显影。

在上述Solution A+Solution B混合液基础上加入Solution C：推荐稀释比例：Solution A: Solution B混合液中加入 C 液至终浓度 1:500~1:100；示例：1 mL Solution A: Solution B混合液中加入2μl  Solution C 液即稀释500倍；混匀后均匀覆盖膜，立即曝光 / 自动模式采集；弱信号可适当延长曝光，背景仍保持极低。

注：C 液浓度越高，背景抑制越强；过量会轻微削弱强信号条带，建议按 100–500 倍梯度优化。

注意事项

1) Solution A、Solution B和Solution c在吸取过程中必须要更换枪头，两种溶液相互污染后会导致逐渐失效，影响后续的使用效果；

2) Solution c液为动力学调节剂，浓度需按实验优化，避免过量。

3) 各溶液使用后，请盖紧瓶盖，以防失效；

4) ECL的荧光持续时间很长，但开始反应后的30分钟内荧光更强一些，随后荧光会逐渐减弱，因此请注意充分利用这荧光较强的30分钟进行压片；

5) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；

6) 本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内！