n产品参数

n产品简介

本试剂盒是基于鲁米诺底物的化学发光试剂盒，用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶（HRP）的抗体及其关联的抗原。主要应用于Western检测以及化学发光免疫检测系统。检测原理是，蛋白混合物经电泳后转移到印迹膜上，经辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗体与膜上的蛋白直接或间接特异反应，然后发光检测工作液被辣根过氧化物酶（HRP）催化发光，发出特定波长荧光（400-450 nm），从而可以通过X光胶片压片曝光或化学发光成像设备直接扫描检测信号。

本试剂盒使用了新型高效增强剂，发光强度比传统ECL显色液显著提高，并有效降低了背景。本司提供三款不同检测灵敏度的ECL试剂盒，可适配不同丰度的目的蛋白检测，对于丰度比较高的目的蛋白的检测，例如内参蛋白等的检测，推荐使用性价比更高的高敏型试剂盒；对于低丰度较难检测的目的蛋白，优先推荐使用特超敏试剂盒。

n保存条件

2-8℃保存，有效期12个月。Solution A需注意避光保存。

n使用方法

1. 按常规Western blot操作进行，二抗孵育后，在进行最后一次洗涤时根据膜的大小（每10 cm2 膜混合0.5 mL Solution A和0.5 mL Solution B），按照Solution A: Solution B=1:1比例配制发光检测工作液。

注：工作液建议现配现用，配制后室温放置数小时后灵敏度可能略有降低。

2. 用平头镊子将膜取出，膜的下缘轻轻接触吸水纸，以去除膜上多余的液体。膜的蛋白面朝上，用吸管将配制的发光检测液转移到蛋白膜上，使其均匀覆盖，室温孵育2 min。

注：增加孵育时间不会增加灵敏度，有时还会导致条带曝光时显示异常。发光过程的本质是酶促反应，加入发光液过少同样不利反应进行，会导致膜上条带曝光不均和灵敏度明显降低。

3. 用平头镊子夹持蛋白膜，膜的下缘轻轻接触吸水纸，以去除膜上多余的发光液。将膜的蛋白面朝上并包裹于洁净保鲜膜内，轻轻赶出气泡。

4. 压片检测：将膜固定在暗盒后，暗房内取出X光胶片放置暗盒中压片1分钟，立即显影定影，根据其曝光结果，缩短或延长下一张X光胶片的压片时间。

5. 化学发光成像仪检测：将膜直接放置于化学发光成像仪载物台中，然后参考仪器的说明书进行信号检测。

n温馨提示

1．Solution A和Solution B在吸取过程中必须要更换枪头，两种溶液相互污染后会导致逐渐失效，影响后续的使用效果；

2．各溶液使用后，请盖紧瓶盖，以防失效；

3．ECL的荧光持续时间很长，但开始反应后的30分钟内荧光更强一些，随后荧光会逐渐减弱，因此请注意充分利用这荧光较强的30分钟进行压片；

4．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；

5．本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内！

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